桔梗多糖的复合酶提取、结构表征及抗氧化活性分析

目的：优化复合酶法提取桔梗多糖工艺，并初步分析桔梗多糖的结构和体外抗氧化活性。方法：分别考察酶添加量、料液比、酶解时间、酶解温度对桔梗多糖提取率的影响，采用响应面法进行提取条件优化，利用高效液相色谱法（HPLC）测定多糖的分子量和单糖组成，应用核磁共振（NMR）和扫描电镜（SEM）对多糖的糖苷键和形貌进行分析，并对多糖清除自由基的能力和还原力进行研究。结果：桔梗多糖的最佳提取工艺：纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶的添加量为2%，酶解时间90 min，料液比30 mL/g，酶解温度50 ℃，在此条件下，多糖实际提取率为（9.01%±0.07%），多糖含量达（92%±0.76%）。纯化后得到桔梗多糖组分PGP-W-1，分子量为6.2 kDa，由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖按照摩尔比4.9:4.3:7.9:7.8:4.8:18.6组成，是一种具有α型糖苷键和β型糖苷键的吡喃型多糖。体外抗氧化试验显示PGP-W-1对DPPH自由基、ABTS自由基和羟基自由基清除率IC50值分别为2.31、1.66、0.59 mg/mL。结论：本研究优选出的桔梗多糖提取工艺切实可行，多糖提取效率高并表现出良好的体外抗氧化活性。