过表达TIPE2对肝癌生长和转移的影响

目的 探讨肿瘤坏死因子诱导蛋白8样蛋白2(tumor necrosis factor-alpha-induced protein 8-like 2,TIPE2)对肝癌生长和转移的作用及调控机制.方法 采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测TIPE2在肝癌细胞系和正常肝细胞(L02)中的表达;将本实验室构建的空对照腺病毒(AdV)及AdVTIPE2分别感染肝癌细胞,并检测其转染效率.用CCK-8、划痕愈合实验及Transwell侵袭实验检测肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力.与人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)共培养后,用小管形成实验检测细胞促血管形成能力,并观察HUVEC细胞的迁移、侵袭能力的变化.酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞培养上清中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)含量;Western blot 法检测 VEGF、缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP9)蛋白水平.结果 TIPE2在肝癌细胞中表达降低;过表达TIPE2能显著抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,以及内皮细胞的血管形成和迁移、侵袭能力.此外,TIPE2过表达能抑制VEGF的蛋白分泌,并且还可下调VEGF、HIF-1α和MMP9的蛋白表达水平.结论 过表达TIPE2可抑制肝癌细胞的生长和转移,其机制可能与HIF-1α/VEGF信号通路失活及MMP9的表达下调,从而抑制新生血管形成有关.