益心定悸方对缺血性心律失常大鼠微RNA-1及其调控蛋白缝隙连接蛋白43的影响

目的 探究益心定悸方对缺血性心律失常大鼠微RNA-1(miRNA-1)及其调控蛋白缝隙连接蛋白43(Cx43)的影响.方法 将60只雄性SPF级10周龄体重(250±20)g的SD大鼠采用随机数字表法分为六组,假手术组,模型组,普萘洛尔对照组,益心定悸方低、中、高剂量组,每组10只.动物喂养1周后,实施灌胃处理.益心定悸方低、中、高剂量组给予13.95、27.90、55.80 g/(kg·d)益心定悸方,普萘洛尔对照组给予普萘洛尔(9.5mg/7ml),每天灌胃5mg/kg,模型组和假手术组灌胃等量生理盐水,1次/d,每组均处理2周.除假手术组外,其余各组灌胃结束后立即造模,通过左冠状动脉前降支结扎,构建大鼠缺血性心律失常模型,假手术组只开胸不结扎.造模后采集大鼠心肌组织,采用定量逆转录聚合酶链反应和Western blot检测miRNA-1与Cx43的表达量及Cx43在Ser262和Ser368位点的磷酸化水平.结果 与假手术组比较,模型组miRNA-1表达量升高,Cx43表达量减少(P＜0.05);与模型组比较,益心定悸方低、中、高剂量组miRNA-1表达量降低,益心定悸方中、高剂量组Cx43表达量升高(P＜0.05);与益心定悸方低、中剂量组比较,益心定悸方高剂量组miRNA-1表达量降低,Cx43表达量升高(P＜0.05).与假手术组比较,模型组的Cx43在位点Ser262和Ser368的磷酸化修饰水平降低(P＜0.05);与模型组比较,益心定悸方高剂量组的Cx43在位点Ser262和Ser368的磷酸化修饰水平升高(P＜0.05);与益心定悸方低剂量组比较,益心定悸方高剂量组的Cx43在位点Ser262和Ser368的磷酸化修饰水平升高(P＜0.05);益心定悸方高剂量组的Cx43在位点Ser262和Ser368的磷酸化修饰水平与益心定悸方中剂量组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).苏木精-伊红结果显示,益心定悸方高剂量组可减轻缺血再灌注引起的心肌细胞损伤.结论 益心定悸方可能通过下调心肌组织miRNA-1表达量,减弱Cx43的转录后抑制程度,从而有效纠正Cx43的表达.本研究对益心定悸方的药理学做了初步探索,对缺血性心律失常的有效防治提供了理论支撑.