趋化素在特发性肺纤维化中的表达及其保护作用研究

目的:探讨趋化素在特发性肺纤维化（IPF）中的表达及其作用。方法:分别使用定量PCR与蛋白质免疫印迹法测定对照与IPF患者肺部组织中趋化素的mRNA及蛋白表达水平，通过酶联免疫吸附实验检测临床血清样本中趋化素的含量。构建肺纤维化体外模型，将分离得到的原代成纤维细胞分成对照组、TGF-β组、TGF-β+趋化素组和趋化素组，使用免疫荧光法检测各组成纤维细胞α-平滑肌蛋白（α-SMA）表达水平。构建肺纤维化体内模型，采用随机分组法将C57BL/6小鼠分成对照组、博来霉素组、博来霉素+趋化素组和趋化素组，通过肺组织病理学染色观察各组小鼠肺纤维化严重程度。通过定量PCR与免疫组化染色法分别检测肺纤维化体外与体内模型中上皮间充质转化（EMT）标记基因的表达情况。结果:与对照组相比，IPF患者肺组织与血清中趋化素表达量均下调。免疫荧光结果显示，TGF-β组α-SMA表达水平较对照组明显增强，TGF-β+趋化素组中α-SMA表达水平则与对照组相仿。病理学染色结果显示，博来霉素组小鼠较对照组肺组织纤维化病变明显，趋化素表达量显著下调；博来霉素+趋化素组小鼠肺组织受损程度则有所缓解。定量PCR与免疫组化结果显示，趋化素在A549细胞与小鼠肺组织中分别减弱了由TGF-β与博来霉素诱导的EMT作用。结论:趋化素在IPF患者中表达降低；趋化素可能通过调控EMT而在肺纤维化的发生中发挥保护作用。