异烟肼导致大鼠肝损伤后对基因启动子区CpG岛甲基化水平的影响

目的 研究细胞色素P450(CYP) 1A1和细胞色素P450(CYP) 1B1基因启动子区CpG岛甲基化水平与异烟肼导致大鼠肝损伤的关系.方法 将实验-Ⅰ、实验-Ⅱ、实验-Ⅲ、实验-Ⅳ、实验-Ⅴ、实验-Ⅵ组分别用55 mg·kg-1·d-1异烟肼灌胃3,7,10,14,21,28 d,空白组给予等容积蒸馏水.以全自动生化分析仪检测血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性;用实时荧光定量聚合酶链反应检测CYP 1A1、1B1基因mRNA表达水平;以甲基化特异性PCR技术检测CYP 1A1、1B1启动子区CpG岛甲基化水平.结果 CYP 1A1和CYP 1B1启动子区CpG岛甲基化水平,随给药时间的延长,均呈升高趋势:实验-Ⅰ组、实验-Ⅱ组、实验-Ⅲ组、实验-Ⅳ、实验-Ⅴ组及实验-Ⅵ组的CYP 1A1甲基化水平分别为0.43 ±0.03,0.39±0.04,0.54±0.02,0.67±0.08,0.68±0.04,0.79±0.04,与空白组的0.33±0.03相比,差异均有统计学意义(均P＜0.05).实验-Ⅰ组、实验-Ⅱ组、实验-Ⅲ组、实验-Ⅵ、实验-Ⅴ组及实验-Ⅵ组的CYP 1B1甲基化水平分别为0.40±0.05,0.40 ±0.04,0.47±0.02,0.54±0.02,0.54±0.03,0.57±0.03,与空白组的0.33±0.02比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).CYP 1A1甲基化水平与ALT、AST的表达呈正相关(r分别为0.739,0.493;均P＜0.05),CYP 1B1甲基化水平与ALT、AST的表达亦呈正相关(r分别为0.769,0.597;均P＜0.05),即两基因启动子区的甲基化水平与肝损伤的发生有关.CYP1A1、1B1启动子区CpG岛的甲基化水平与mRNA表达水平呈负相关(r分别为-0.824,-0.559,P＜0.05).结论 异烟肼致肝损伤大鼠中基因启动子区CpG岛甲基化水平升高.