桂牧一号杂交象草在人工瘤胃培养液中蛋白质及氨基酸的消化规律研究

为了研究桂牧一号杂交象草在人工瘤胃培养液中蛋白质和氨基酸的消化规律,筛选消化受阻蛋白并分析其功能,试验将3只黑山羊成年羯羊的瘤胃液与人工唾液以1:2的体积比混合,配制成人工瘤胃培养液,采用产气法消化10 g桂牧一号杂交象草,测定桂牧一号杂交象草原料及在人工瘤胃培养液中不同消化时间点(12,24,48小时)的干物质、蛋白质(粗蛋白、真蛋白、可溶性粗蛋白)相对含量,计算其消化率;采用定量蛋白组学筛选不同消化时间点的消化受阻蛋白,并对消化12 h的消化受阻蛋白进行亚细胞定位、基因本体(GO)注释和酶活性注释;测定不同消化时间点桂牧一号杂交象草样品中氨基酸含量及消化率.结果表明:桂牧一号杂交象草样品随消化时间的延长,粗蛋白和真蛋白的消化率逐渐升高,消化24小时时的可溶性粗蛋白消化率低于12小时时;与0小时对比,消化12小时时鉴定到66个消化受阻蛋白,消化24小时时鉴定到105个消化受阻蛋白,消化48小时时鉴定到112个消化受阻蛋白;消化12,24,48小时时的消化受阻蛋白都主要定位于叶绿体中;消化12小时时的消化受阻蛋白主要分布在RNA代谢过程、细胞组分发生、大分子复合物亚基组成等生物学过程,类囊体部分、类囊体、叶绿体类囊体、质体类囊体等细胞组分,结合、杂环化合物结合、有机环状化合物结合等分子功能;消化12小时时的消化受阻蛋白具有水解酶功能的蛋白数量最多,其次是转移酶、氧化还原酶等;桂牧一号杂交象草氨基酸含量整体呈0～24 h上升、24～48 h降低的趋势,消化12小时时,丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、组氨酸、精氨酸的消化率较低(<10％),其中组氨酸消化率最低(0.41％).说明在人工瘤胃培养液条件下,桂牧一号杂交象草的蛋白质和氨基酸的消化存在阻滞现象.