纯种西门塔尔牛冷冻胚胎分割条件优化试验

为了提高纯种西门塔尔牛冷冻胚胎分割后的半胚发育率,试验选取牛一级冷冻胚胎在胚胎保存液、mCR1 aa(前期)液、mCR1 aa(后期)液3组培养液中培养24 h,测定胚胎发育率;牛一级冷冻胚胎解冻后分为0,15,30,45,60,90,120 min组培养后进行分割,将对照组整胚和分割后的半胚培养24 h,测定胚胎发育率;牛一级冷冻胚胎分割后的半胚分为不经短暂培养(no short culture,NSC)和30 min组作为试验组,整胚分为NSC对照、30 min对照组,将4组胚胎分别装入含胚胎冷冻液的0.25 mL细管中,在4℃冰箱放置30 min,之后在室温(25℃)下推入胚胎保存液中洗3次,再培养24 h,测定各组胚胎发育率.将纯种西门塔尔牛一级冷冻胚胎利用优化后的分割条件进行二分操作,分为整胚、双半胚、单半胚,用胚胎移植枪直接移植到受体牛子宫角,并用双半胚进行同侧移植,测定受体母牛妊娠率、流产率、双犊率、犊牛成活率.结果表明:mCR1 aa(前期)液组、mCR1 aa(后期)液组胚胎发育率极显著高于胚胎保存液组(P<0.01);试验组中解冻后培养45 min组胚胎发育率最高,与对照组无显著差异(P>0.05);NSC组胚胎发育率极显著高于30 min组(P<0.01);整胚、双半胚、单半胚组的妊娠率、流产率、犊牛成活率差异不显著(P>0.05),双半胚组的双犊率极显著高于整胚组、单半胚组(P<0.01).说明纯种西门塔尔牛冷冻胚胎解冻后用mCR1 aa(后期)液培养45 min再分割,获得的半胚直接移植可有效提高冷冻胚胎利用效率和分割后半胚移植妊娠率.