多嘧啶序列结合蛋白2通过调控Slug促进乳腺癌细胞上皮-间充质转化的机制

目的 探讨多嘧啶序列结合蛋白2(PTBP2)在乳腺癌组织及细胞中的表达,探讨PTBP2通过调控上皮-间充质转化(EMT)影响乳腺癌细胞的侵袭和迁移的具体分子机制.方法 利用蛋白质印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测PTBP2在乳腺癌细胞中的表达水平.并利用Transwell实验、侵袭实验检测PTBP2对乳腺癌细胞迁移侵袭能力的影响.两组之间的比较采用独立样本t检验.结果 Western blot及RT-PCR结果表明PTBP2在乳腺癌组织中的表达水平明显高于正常组织(7.22±0.27比3.02±0.16,t=13.33,P＜0.01);敲低PTBP2表达后,MDA-MB-231细胞迁移能力、侵袭能力明显弱于对照组(30.20±1.56比113.80±4.23,t=18.52,P＜0.01;9.60±1.60 比 29.20±4.28,t=4.29,P＜0.01);并导致乳腺癌细胞发生 MET 转变.过表达PTBP2表达后,MCF7细胞迁移能力、侵袭能力明显强于对照组(136.00±5.33比63.40±4.32,t=10.57,P＜0.01;36.20±1.82 比 14.20±1.65,t=8.92,P＜0.01)并导致乳腺癌细胞发生EMT转变.PTBP2表达下调后,MDA-MB-231细胞中EMT相关蛋白表达水平明显低于对照组;PTBP2表达上调后,MCF7细胞中EMT相关蛋白表达水平明显高于对照组.PTBP2通过调控EMT的转录因子Slug基因,从而调控乳腺癌细胞的迁移、侵袭及MET.结论 PTBP2在乳腺癌中高表达,并通过上调Slug基因表达促进乳腺癌细胞发生EMT.