银杏二萜内酯通过拮抗PAFR和调节SIRT1/STAT3抑制氧化应激诱导的PC12神经元衰老研究

目的 探讨银杏二萜内酯(ginkgo diterpene lactone,GDL)对氧化应激诱导的细胞衰老的保护作用及机制.方法 建立H2O2诱导PC12神经元衰老细胞模型,分别给予血小板活化因子拮抗剂WEB-2086或GDL预处理,采用CCK-8试剂盒检测细胞活性;β-半乳糖甘酶染色法检测衰老细胞率;DAPI染色法观察细胞平均核体积:Western blotting检测p21、p53、核纤层蛋白 B1(Lamin B1)、血小板活化因子受体(platelet activating factor receptor,PAFR)、沉默调节蛋白 1(Sirtuin 1,SIRT1)、磷酸化信号转导和转录激活蛋白 3(phosphorylated signal transducer and activator of transcription 3,p-STAT3)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)、神经营养因子 3(neurotrophin3,NT3)和神经生长因子(nerve growth factor,NGF)蛋白表达;TUNEL染色法观察细胞凋亡.结果 与对照组比较,模型组显著降低了细胞的活性(P＜0.05),衰老细胞数显著增加(P＜0.01),PAFR表达显著升高(P＜0.001).与模型组比较,WEB-2086显著抑制PAFR表达(P＜0.001),显著升高SIRT1蛋白表达(P＜0.05),显著减少β-半乳糖甘酶衰老细胞率(P＜0.05);GDL显著升高了细胞活力(P＜0.05),显著上调 Lamin B1、SIRT1、BDNF、NT3 的表达(P＜0.05、0.01),显著下调 PAFR、p-STAT3、p21、p53蛋白表达(P＜0.05、0.01).结论 GDL可以保护神经元并抑制细胞凋亡,延缓H2O2代表的氧化应激诱导PC12神经元的衰老,其机制可能与拮抗PAFR、调节SIRT1/STAT3信号通路有关.