猪捷申病毒2型SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立

猪捷申病毒2型(PTV2)属于小RNA病毒科、捷申病毒属,主要引起猪的脑脊髓灰质炎、肺炎、下痢、心包炎、心肌炎和繁殖障碍等症状.为了建立一种快速且灵敏的PTV2检测方法,本研究扩增VP1基因保守区域,建立PTV2的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法,并进行敏感性、特异性和重复性试验.结果显示,本研究建立的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法Ct值与标准品模板在1.21×109～1.21×101 copies/μL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.996 7,斜率为-3.743 4.本试验检测灵敏度可达到1.21×101copies/μL.该方法对PRoV、TGEV、PDCoV等猪常见病原检测均无特异性扩增.该方法组内组间变异率小于1％.运用该方法进行样本检测,PTV阳性检出率为12.24％,普通PCR检出率为0.综上所述,本研究成功建立了 PTV2 SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法,为快速准确检测PTV2提供了高效技术支持.