一测多评法和指纹图谱在维血宁合剂质量控制中的应用

目的:采用一测多评(QAMS)法测定维血宁合剂中8个有效成分的含量,建立"中间体-成品"的HPLC指纹图谱,为其质量控制提供参考和依据.方法:采用高效液相色谱法,使用Acclaim120 C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以甲醇(A)-0.2％磷酸水溶液(B)-0.1％磷酸(C)为流动相,进行梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为210 nm,柱温为30℃.以虎杖苷为内参物,分别考察儿茶素、表儿茶素、白藜芦醇、槲皮素、木犀草素、染料木素和芒柄花素7个成分的相对校正因子.采用相对校正因子计算3批维血宁合剂提取液、清膏和成品中7个成分的含量和指纹图谱,与外标法(ESM)进行比较,验证QAMS法的准确性和可行性.结果:儿茶素、表儿茶素、虎杖苷、白藜芦醇、槲皮素、木犀草素、染料木素和芒柄花素的线性范围分别为 1.066～53.300、1.062～53.100、4.384～219.200、1 118～55.900、1.036～51.800、1.110～55.400、1.040～52.000、0.530～53.000μg·mL-1.以虎杖苷为参照物,其他7个成分的相对校正因子分别为0.375 4、0.348 6、0.585 3、0.597 2、0.517 6、0.588 7、0.659 9,在不同的实验条件下重复性较好.9个批次提取液、清膏、成品中8个成分的含量范围:虎杖苷为45.26～90.45 μg·mL-1,儿茶素为21.29～38.18 μg·mL-1,表儿茶素为15.06～21.46μg·mL-1,白藜芦醇为6.26～8.57μg·mL-1,槲皮素为1.22～2.13μg·mL-1,木犀草素为3.35～4.44 μg·mL-1,染料木素为1.97～3.17μg·mL-1,芒柄花素为0.65～1.13 μg·mL-1.3批维血宁合剂的指纹图谱有27个共有峰,并且指认了以上8个成分峰,绝大部分相似度在0.9以上.结论:以虎杖苷为内参物建立的QAMS法操作简单,省时高效,可为维血宁合剂的质量控制提供参考.