球形孢子丝菌亲环素B的功能和定位研究

目的 研究球形孢子丝菌亲环素B(CypB)的抗原性、免疫原性以及亚细胞定位.方法 通过生物信息学方法从球形孢子丝菌基因组数据库中鉴定出CypB基因(Sg.CypB)及其蛋白(Sg.CypB).通过原核表达的方法表达出重组Sg.CypB(rSg.CypB).将纯化的重组蛋白免疫SD大鼠获得抗rSg.CypB抗体,用ELISA法检测获得的抗体滴度.用获得的抗体对球形孢子丝菌行免疫荧光染色,观察Sg.CypB在球形孢子丝菌上的分布.结果Sg.CypB基因长930 bp,编码的Sg.CypB含有309个氨基酸.预测Sg.CypB具有分泌信号肽和C端跨膜序列,蛋白主体部位位于细胞外,具有典型的肽基脯氨酸顺反异构酶(PPIase)活性,且能检测出原核表达的rSg.CypB具有PPIase活性.利用大鼠产生的抗rSg.CypB抗体(滴度达到1∶51 200,P＜0.05),免疫荧光检测到Sg.CypB位于球形孢子丝菌表面.结论Sg.CypB是位于球形孢子丝菌表面的具有PPIase活性的抗原分子,可能在真菌-宿主相互作用中发挥作用.