黄牛circCAP2在前体脂肪细胞分化过程中的功能研究

环状RNA(circular RNA,circRNA)在调节前体脂肪细胞的增殖和分化中起着重要作用.前期高通量测序结果显示,circRNA-环化酶相关肌动蛋白细胞骨架调节蛋白2(circRNA-cyclase associated actin cytoskeleton regulatory protein 2,circCAP2)在黄牛(Bos taurus)前体脂肪细胞分化前后表达具有差异性.为探讨circCAP2在前体脂肪细胞分化过程中的作用机制,本研究通过Sanger测序及qPCR技术对circCAP2进行鉴定和表达模式分析.进一步利用过表达和干扰技术将其转染至黄牛前体脂肪细胞中,利用油红O染色方法检测脂肪细胞脂质积累情况,通过qPCR检测成脂标志基因表达,结果显示,circCAP2是真实存在且稳定表达的circRNA,在成熟的脂肪细胞中极高表达(P＜0.01).circCAP2过表达实验表明,在黄牛前体脂肪细胞中,过表达circCAP2显著促进脂肪细胞的脂质累积,显著上调成脂标志基因过氧化物酶增殖激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptor gamma,PPARγ)、脂肪酸结合蛋白4(fatty acid binding protein 4,FABP4)、增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer-binding protein α,C/EBPα)和C/EBPβ的表达(P＜0.05).而circCAP2干扰实验显示,干扰circCAP2显著抑制脂肪细胞中的脂质累积,且成脂标志基因PPARγ、FABP4、C/EBPα和C/EBPβ的表达水平显著下调(P＜0.05).综上表明,circCAP2可能是黄牛前体脂肪细胞分化的正调控因子,可作为改善黄牛育种中脂肪沉积的新型标志物.本研究为深入探究circCAP2在黄牛脂肪沉积中的调控机制提供参考.