基于BSA-seq技术对番茄封顶花序节位基因的精细定位

主茎花序数的多少影响着自封顶类型番茄(Solanum lycopersicum)的产量,精细定位其封顶花序节位基因,可为进一步基因克隆以及功能分析、调控机理解析提供依据.本研究以低节位自封顶番茄品系AXF和高节位自封顶番茄品系GXF为亲本构建F2分离群体,应用混合群组分离分析测序(bulked segregant analysis sequencing,BSA-seq)和分子标记方法进行了连锁分析及基因定位.结果表明,关联区间位于2号染色体47.56～47.59 Mb,大小约为25497 bp,含有3个候选基因(硫代硫酸硫转移酶18(thiosulfatesul furtransferase 18,TST18)(GenBank No.XM_004232452.4),MLO类家族蛋白4(MLO-like protein 4,MLO4)(GenBank No.XM_019212390.2)和26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基4(26S proteasome non-ATPase regulatory subunit 4,PSMD4)(GenBank No.XM_010318126.3)).进一步开发 118 对InDel(insertion-deletion)/CAPS(cleaved amplified polymorphism sequences)/dCAPS(derived CAPS)引物进行精细定位,筛选获得1对多态性高的dCAPS14分子标记,该标记与PSMD4紧密连锁.qRT-PCR分析表明该候选基因在两个亲本不同组织中的表达量存在显著性差异.PSMD4功能为参与泛素-蛋白酶体系统介导的蛋白降解,可能对番茄封顶花序节位起着重要调控作用.本研究对分子辅助选育易于栽培操作的理想型自封顶番茄品种具有重要意义.