TCT-305 The Effect of Diltiazem Versus Placebo on Microvascular Dysfunction Assessed by Serial Continuous Thermodilution Measurements: Results of the EDIT-CMD Trial

Valider le dosage de sept inhibiteurs de l’enzyme de conversion (IEC) et trois métabolites actifs (périndopril, périndoprilate, captopril, énalapril, énalaprilate, lisinopril, ramipril, ramiprilate, bénazépril, quinapril) dans le plasma par CL-SM/SM, et permettre la réalisation d’une toxicocinétique chez deux patients intoxiqués au ramipril et au périndopril.Deux cent μL de plasma sont déprotéinisés par du sulfate de zinc et 10 μL du surnageant sont injectés dans un système CL-SM/SM TSQ Vantage (ThermoFisher) après ajout de l’étalon interne (périndopril-d4). La séparation est réalisée sur une colonne C18 Polar (100 × 2,1 mm, 2,6 μm, Phenomenex®) par un gradient de formiate d’ammonium 2 mM et d’acétonitrile et la détection est en mode MRM. La technique a été validée selon les recommandations de l’agence européenne du médicament et appliquée à deux patients admis en réanimation suite à l’ingestion de 150 mg de ramipril et 40 mg de périndopril.La méthode est linéaire sur un intervalle allant de 1 à 1000 ng/mL. Les limites de quantification varient entre 1 et 30 ng/mL. La justesse (biais) et la fidélité (CV) sont < 14 %. Les concentrations maximales (Cmax) après ingestion de 60 fois la dose journalière recommandée de ramipril et 8 fois celle de périndopril ont été obtenues pour le premier prélèvement recueilli soit à H3 (ramipril 257 ng/mL, ramiprilate 3459 ng/mL) et à H7,5 (périndopril 579 ng/mL, périndoprilate 386 ng/mL). Les concentrations plasmatiques étaient 7 à 43, 86 à 692, 4 à 30 et 8 à 64 fois plus élevées que celles décrites comme thérapeutiques dans la littérature et sont considérées comme toxiques. Les demi-vies d’élimination du ramipril/ramiprilate (5 et 25 h) et du périndoprilate (23 h) étaient similaires à celles décrites dans la littérature alors que celle du périndopril (11 h) était 1,6 à 2 fois plus longue par apport aux valeurs rapportées, probablement en rapport avec l’insuffisance rénale du patient. L’association d’autres médicaments cardiotropes au périndopril à des concentrations toxiques, à l’origine d’une intoxication gravissime, a conduit au décès de ce patient à J2 de son admission.Cette méthode validée a permis d’étudier la toxicocinétique du ramipril et du périndopril et de leur métabolite actif et de documenter pour la première fois les concentrations observées et les paramètres toxicocinétiques lors d’intoxications aiguës.To validate the quantification of seven angiotensin converting enzyme inhibitors (ACE) and three active metabolites (perindopril, perindoprilat, captopril, énalapril, enalaprilat, lisinopril, ramipril, ramiprilat, benazepril, quinapril) in plasma by LC-MS/MS, and to apply it to a toxicokinetic study of ramipril and perindopril following acute intoxications.Two hundred μL of plasma are deproteinized with zinc sulfate and 10 μL of the supernatant are injected into a UPLC-MS/MS TSQ Vantage system (ThermoFisher) after addition of internal standard (perindopril-d4). The separation is carried out on a C18 Polar column (100 × 2.1 mm, 2.6 μm, Phenomenex®) using 2 mM ammonium formate and acetonitrile gradient, and the detection is in MRM mode. This method was validated according to the recommendations of the European Medicines Agency (EMA) and was applied to 2 acute intoxications involving ramipril and perindopril, one with a fatal outcome.The method is linear from 1 to 1000 ng/mL. Limits of quantification range from 1 to 30 ng/mL. The accuracy (bias) and precision (CV) are < 14%. The ingested amounts of ramipril and perindopril are respectively 60 and 8 times higher than the daily recommended dose. The peak concentrations (Cmax) were obtained at H3 for ramipril (257 ng/mL) and ramiprilat (3459 ng/mL) and at H7,5 for perindopril (579 ng/mL) and perindoprilat (386 ng/mL). These concentrations are respectively 7 to 43, 86 to 692, 4 to 30 and 8 to 64 times higher than those described as therapeutic in the literature and are considered as toxic. The elimination half-lives of ramipril/ramiprilat (5 and 25 h), and perindoprilat (23 h) are similar to those described in the literature, whereas that of perindoprilat (11 h) are 1.6 to 2-fold longer than the reported values, probably in agreement with the moderate renal failure in this patient. The association of other cardiovascular drugs at toxic levels led to the death of this patient 2 days after admission.This validated method has allowed the toxicokinetic study of ramipril and perindopril and provides interesting data regarding concentrations and toxicokinetic parameters observed during acute intoxications.