隔药灸对克罗恩病大鼠结肠黏膜巨噬细胞M1/M2型极化的影响

目的:观察隔药灸对克罗恩病(CD)大鼠结肠黏膜巨噬细胞M1/M2 型极化及炎性因子表达的影响,探讨其作用机制.方法:将 40 只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、西药组、隔药灸组,每组 10 只.采用2,4,6-三硝基苯磺酸灌肠法制备CD模型.造模成功后隔药灸组大鼠给予隔药饼灸"天枢""气海",每次每穴灸2 壮,每日1次,共10d.西药组大鼠给予美沙拉嗪灌胃,每日2 次,共10d.治疗结束后取各组大鼠结肠上皮组织,分离、纯化和培养结肠黏膜固有层巨噬细胞.HE染色法观察结肠组织病理变化;透射电镜观察结肠组织超微结构;Western blot法检测结肠黏膜巨噬细胞α7 烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)、核因子κB(NF-κB)p65、肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达水平;流式细胞术检测结肠黏膜组织M1、M2型巨噬细胞的数量;免疫荧光法检测结肠黏膜组织M1、M2 型巨噬细胞的表达情况.结果:与正常组比较,模型组大鼠结肠组织呈现巨大溃疡及炎性表现,结肠上皮细胞连接疏松,细胞器结构破坏;结肠黏膜巨噬细胞α7nAChR表达水平降低(P＜0.01),NF-κB p65 和TNF-α表达水平升高(P＜0.01);结肠黏膜M1、M2型巨噬细胞数量和表达增加(P＜0.01,P＜0.05).与模型组比较,隔药灸组和西药组大鼠结肠形态结构改善,肠道炎性反应减轻,结肠上皮细胞连接较紧密,细胞器形态较正常;结肠黏膜巨噬细胞α7nAChR表达水平升高(P＜0.01),NF-κB p65 及TNF-α表达水平降低(P＜0.01),结肠黏膜M1 型巨噬细胞数量和表达减少(P＜0.05),M2 型巨噬细胞数量和表达增加(P＜0.05).结论:隔药灸可能是通过上调CD大鼠结肠黏膜巨噬细胞α7nAChR的表达来抑制N F-κB活化,并促使巨噬细胞由M1 向M2 型极化,减少M1巨噬细胞比例,抑制结肠黏膜TNF-α的表达,从而有效抑制肠道炎性反应.