特异性敲除肠上皮Toll样受体4基因促进小鼠移植瘤的增殖

目的:从肠道菌群和肠黏膜屏障角度探讨肠上皮Toll样受体4(TLR4)基因特异性敲除(IEC-CreTLR4KO)促进小鼠皮下移植瘤增殖的可能机制.方法:设IEC-CreTLR4KO组、IEC-TLR4flox/flox组和BALB/c野生型组,注射CT-26结肠癌细胞于各组小鼠的右腋下皮肤,细胞数为4×105个,观察并记录各组小鼠移植瘤体积以及体质量,检测肿瘤增殖标记物Ki67;16S rDNA高通量测序检测各组小鼠结肠粪便,分析肠道菌群的丰度与多样性;GMrepo数据库分析差异菌的肿瘤相关性;光、电镜技术观察肠黏膜形态结构;免疫组织化学检测小鼠肠上皮细胞紧密连接蛋白ZO-1表达.结果:相较于BALB/c组和IEC-TLR4flox/flox组,IEC-CreTLR4KO荷瘤组小鼠肿瘤体质量比显著增高;与BALB/c组相比,IEC-CreTLR4KO组小鼠肠道菌群丰度和多样性增加,其中f_Enterococcaceae、g_Erysipelatoclostridium及g_Mucispirillum丰度增高,而f_Tannerellaceae、g_RuminococcaceaeUCG_010丰度降低;上述关键差异菌与肿瘤等疾病密切相关;电镜观察显示IEC-CreTLR4KO组小鼠空肠上皮细胞间的连接结构松散,同时空肠和结肠上皮细胞ZO-1表达显著下降.结论:肠上皮TLR4基因特异性敲除促进小鼠移植瘤的增殖,可能与该基因缺失后引起肠道菌群变化和肠黏膜屏障破坏密切相关.