梨果实钾转运体基因PbKT12的克隆与功能验证
Acta Horticulturae Sinica（2023）
摘要
PbKT12是基于梨果实转录组分析筛选出的对施钾有强烈响应的钾转运体基因,本研究中进一步验证其功能.以'黄冠'(Pyrus pyrifolia Nakai)梨果实为材料克隆得到PbKT12全长序列,分析表明该基因序列共2 730 bp,编码909个氨基酸;序列对比表明PbKT12与苹果中同源蛋白氨基酸序列相似性高达97％.亚细胞定位结果显示,PbKT12定位于细胞质膜上.PbKT12转化钾吸收缺陷型酵母R5421在低于5 mmol·L-1 K+的培养基上能够恢复生长.qRT-PCR结果表明,PbKT12在梨果实和叶片中的相对表达量随盆栽土壤施钾水平增加而升高.使用农杆菌侵染花序法将PbKT12导入拟南芥,与野生型拟南芥相比,过表达PbKT12拟南芥植株的生长速度比野生型更快,抽薹、开花时间更早,植株葡萄糖积累量更高.采用X射线荧光光谱仪无损检测K+在拟南芥植株中的分布发现,在缺钾胁迫下过表达PbKT12拟南芥中K+向花序运输的量增加.因此推断,PbKT12在梨果实中具有促进K+转运和葡萄糖积累的作用.
更多关键词
pear,fruit,potassium transporter gene,function identification,Arabidopsis,X-ray fluorescence spectroscopy
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