α-MSH对MC3T3-E1增殖、分化、矿化及其对OPG、RANKL、M-CSF表达的影响

目的:探讨α-促黑色素(α-MSH)对小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化、矿化及其对骨保护素(OPG)、核因子-κβ受体活化因子配体(RANKL)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)表达的影响.方法:设立空白组,o-MSH(10-9mol·L-1、10-8 mol·L-1和10-7 mol·L-1)作为处理组,逆转录聚合酶链反应检测黑皮质素受体(MCR)表达情况;采用CCK-8法检测细胞增殖,PNPP法检测ALP活性,实时定量聚合酶链反应测定Runx-2、BMP-2、OCN、ALP、OPG、RANKL、M-CSF的基因表达,蛋白质印迹法测定上述指标的蛋白表达,细胞茜红素法测定矿化情况.结果:MC3T3-E1细胞表达MC1R、MC2R、MC4R、MC5R4种受体,与空白组相比,不同浓度组α-MSH均促进细胞增殖(P＜0.01),且明显促进Runx-2、BMP-2、OCN蛋白及基因表达(P＜0.01),提高ALP活性及其基因表达(P＜0.01),同时促进OPG基因和蛋白表达(P＜0.01),显著降低RANKL和M-CSF基因及蛋白表达(P＜0.01),且呈剂量依赖性.结论:α-MSH通过MCR作用于MC3T3-E1细胞,可能通过调控Runx-2的表达促进成骨分化相关基因及蛋白BMP-2、ALP、OCN的表达,同时促进OPG表达,减少RANKL和M-CSF表达,从而调控骨代谢.