参白解毒方基于Wnit/β-catenin信号通路对结直肠癌细胞增殖和迁移的抑制作用

目的:研究参白解毒方对结直肠癌细胞增殖和迁移的药效及其作用机制.方法:用参白解毒方处理人结直肠癌细胞HT29、SW480和SW620,MTT和平板克隆形成实验检测细胞的增殖和自我更新能力;细胞划痕实验检测HT29细胞的迁移能力;实时定量PCR或Western Blot检测上皮-间充质转化(EMT)相关标记物(E-Cadherin、N-Cadherin和Vimentin)、Wnt5a和0-catenin的表达水平;实时定量PCR检测Wnt/β-catenin信号通路下游的结直肠癌肿瘤干细胞标志物CD44和CD133的表达水平.结果:参白解毒方可抑制结直肠癌细胞HT29、SW480和SW620的增殖(P＜0.01,P＜0.05),减少HT29细胞形成克隆的数目(P＜0.05,P＜0.01);细胞划痕实验结果表明参白解毒方可以显著抑制HT29细胞的迁移(P＜0.05,P＜0.01),且具有剂量依赖性.实时定量PCR和Western Blot结果显示,参白解毒方可以剂量和时间依赖性的上调上皮细胞标志物E-Cadherin mRNA和蛋白的表达,下调间质细胞标志物N-Cadherin、Vimentin mRNA和蛋白的表达;参白解毒方同时可以下调Wnt5a、β-catenin mRNA和蛋白的表达,抑制Wnt/β-catenin信号通路活化,显著抑制结直肠癌肿瘤干细胞标志物CD44、CD133的mRNA表达.结论:参白解毒方可以抑制结直肠癌细胞的增殖和迁移,其作用机制可能与调控Wnt/β-catenin信号通路从而逆转结直肠癌细胞EMT的发生,降低结直肠癌细胞干性相关.