hnRNPU过表达抑制PIM1诱导的细胞衰老的机制研究

目的:探讨人前病毒整合位点 1(PIM1)诱导细胞衰老的分子机制.方法:构建过表达PIM1 的 2BS细胞系,通过Western印迹法和衰老相关β-半乳糖苷酶染色实验测定过表达PIM1 是否诱导细胞衰老.免疫沉淀联合质谱分析测定PIM1 是否能有效免疫沉淀核异质核糖核蛋白U(hnRNPU)蛋白.运用Real-time PCR和Western印迹法测定PIM1是否影响hnRNPU mRNA和蛋白表达水平.构建同时过表达PIM1 和hnRNPU的2BS细胞系,运用Western印迹法和衰老相关β-半乳糖苷酶染色实验检测hnNRPU过表达对PIM1诱导的细胞衰老的影响.结果:与空载对照组相比,过表达PIM1 组中衰老信号通路关键基因p53、p21和p16 的表达显著增加(p53,t=4.36,P<0.05;p21,t=3.814,P<0.05;p16,t=4.72,P<0.01),衰老细胞的比例增加(t=6.831,P<0.01).免疫沉淀联合质谱分析结果显示PIM1 能有效免疫沉淀hnRNPU蛋白.PIM1 过表达对hnRNPU的mRNA表达水平没有影响(t=0.295,P=0.783),但是能抑制hnRNPU蛋白的表达(t=33.85,P<0.001).与只过表达PIM1细胞相比,同时过表达PIM1和hnRNPU细胞,衰老信号通路关键基因p53、p21 和p16 的表达下降(p53,t=15.317,P<0.001;p21,t=8.012,P<0.01;p16,t=14.08,P<0.001),衰老细胞的比例降低(t=10.38,P<0.01).结论:hnRNPU过表达抑制PIM1诱导的细胞衰老.