新型冠状病毒中和抗体酶联免疫检测试剂盒的制备及应用

目的 开发一种新型冠状病毒中和抗体酶联免疫检测试剂盒,分析新型冠状病毒中和抗体在新冠疫苗效果监测中的临床应用价值.方法 表达纯化SARS-CoV-2病毒S蛋白RBD结构域和人ACE2蛋白,将RBD蛋白偶联HRP、ACE2蛋白偶联生物素(Bio),制备新型冠状病毒中和抗体检测试剂盒;收集15例注射新冠疫苗志愿者血清,检测新冠疫苗注射前后机体中和抗体水平.结果 注射新冠疫苗前SARS-CoV-2中和抗体阳性率为0.00％,第1、2、3针新冠疫苗注射后11～15 d,阳性率分别为13.33％、93.33％、100.00％,第2针注射后第180～190 d,阳性率降低到33.33％;性能检测分析显示,最低检出限为0.06μg/mL,批内CV<5％,批间CV<10％,线性检测范围为0.030～3.125μg/mL,分析灵敏度验证值为0.040μg/mL,与微量细胞中和试验进行对比,确认与其具有高度一致性.结论 新型冠状病毒中和抗体酶联免疫检测试剂盒性能评价良好,检测方法具有快速、方便、易操作等特点,可以用于评估新冠疫苗的保护效果.