中央杏仁核GABA神经元对小鼠情绪和摄食的调控研究

目的:探讨中央杏仁核(CeA)内γ-氨基丁酸(GABA)能神经元到下丘脑室旁核(PVN)神经通路对小鼠情绪和摄食的调控作用及潜在机制.方法:采用慢性束缚应激(CRS)建立KM小鼠焦虑抑郁样模型.(1)在CRS小鼠和正常对照(NOR)小鼠的PVN注射0.3μL生理盐水(NS)或GABAA受体拮抗剂荷包牡丹碱(BIC),并据此将小鼠分为4组(n=10):NOR+NS组、NOR+BIC组、CRS+NS组和CRS+BIC组.通过旷场实验、高架十字迷宫实验、大理石掩埋实验和强迫游泳实验观察小鼠行为学的变化;观察2周内小鼠摄食和体重的变化.(2)采用荧光金逆行追踪结合荧光免疫组织化学法检测CeA-PVN神经通路.(3)采用化学遗传法将腺相关病毒载体AAV2/9-mDlx-hM3D(Gq)-EGFP-ER2-WPRE-PA定向注射于CeA,小鼠分为4组(n=10):NS(腹腔注射)+NS(PVN微量注射)组、NS+BIC组、氯氮平N-氧化物(CNO)+NS组和CNO+BIC组.观察CeA-PVN的GABA能神经通路对小鼠行为学和摄食体重的影响.结果:行为学结果显示,CRS+NS组出现焦虑抑郁样行为改变;与NOR+NS组相比,CRS+NS组小鼠在6～12 h、12～24 h和2周内的摄食和体重显著降低(P<0.05).PVN注射BIC后CRS小鼠焦虑抑郁样行为显著减轻(P<0.05),6～12 h、12～24 h和2周内的摄食量显著增加(P<0.05),持续给药第8天开始CRS小鼠的体重显著增加(P<0.05).荧光金逆行追踪结合免疫荧光组织化学实验结果显示,CeA的GABA神经元可以投射至PVN.化学遗传法和行为学实验结果显示,与NS+NS组相比,CNO+NS组小鼠出现焦虑抑郁样行为(P<0.05),在6～12 h、12～24 h和2周内的摄食量显著降低(P<0.05),且第6天开始体重显著减轻(P<0.05);与CNO+NS组相比,CNO+BIC组的焦虑抑郁样行为显著减轻(P<0.05),在6～12 h、12～24 h和2周内的摄食量显著增加(P<0.05),给药第8天体重也开始显著增加(P<0.05).结论:CeA-PVN的GABA能神经通路可参与小鼠的情绪行为和摄食调控.