lncRNA GAS6-AS1靶向调控IL-11对子宫内膜基质细胞向成纤维细胞分化的影响

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)生长停滞特异基因转录的反义RNA(GAS6-AS1)靶向调控白细胞介素11(IL-11)对子宫内膜基质细胞(ESCs)向成纤维细胞分化的影响.方法 体外传代培养ESCs,取传3～6代、对数生长期、生长状态良好的ESCs,随机分为TGF-β1未干预组和TGF-β1干预组.TGF-β1未干预组不予TGF-β1干预,TGF-β1干预组用无血清培养基饥饿培养后予TGF-β1干预,收集细胞,采用RT-qPCR法检测lncRNA GAS6-AS1、IL-11及纤维化标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白α1(COL1A1)mRNA表达.另取传3～6代、对数生长期、生长状态良好的ESCs,分别转染三条si-GAS6-AS1序列以及si-Control序列,采用RT-qPCR法验证转染效率.将转染si-GAS6-AS1的ESCs用无血清培养基饥饿培养后予TGF-β1干预,收集细胞,采用Western blotting法检测IL-11、α-SMA、COL1A1蛋白表达,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率.结果 与TGF-β1未干预组比较,TGF-β1干预组lncRNA GAS6-AS1、IL-11、α-SMA、COL1A1 mRNA相对表达量均显著升高(P均<0.01).转染si-GAS6-AS1-1、si-GAS6-AS1-2、si-GAS6-AS1-3及si-Control序列的ESCs GAS6-AS1 mRNA相对表达量分别为0.22±0.04、0.27±0.06、0.81±0.07、1.00±0.00.与转染si-Control序列的ESCs比较,转染si-GAS6-AS1-1、si-GAS6-AS1-2序列的ESCs GAS6-AS1 mRNA相对表达量显著降低(P均<0.01),而转染si-GAS6-AS1-3序列的ESCs GAS6-AS1 mRNA相对表达量降低不明显(P>0.05).因此,选择si-GAS6-AS1-1、si-GAS6-AS1-2序列进行后续实验.与si-Control+TGF-β1组比较,si-GAS6-AS1-1+TGF-β1组和si-GAS6-AS1-2+TGF-β1组IL-11、α-SMA、COL1A1蛋白相对表达量及细胞增殖活性均显著降低,细胞凋亡率均显著升高(P均<0.01).结论 lncRNA GAS6-AS1通过靶向调控IL-11表达抑制ESCs向成纤维细胞分化.