电针透刺法通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路改善膝关节骨关节炎滑膜炎性反应的机制研究

目的:观察电针透刺法对大鼠滑膜Toll样受体4/髓样分化因子88/核转录因子-κB(TLR4/MyD88/NF-κB)信号通路及血清相关炎性因子的影响,探讨电针透刺法对膝关节骨关节炎(KOA)大鼠滑膜炎性反应的影响机制.方法:雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针透刺组、普通电针组,每组16只.采用前交叉韧带离断术结合术后强迫运动制备K O A大鼠模型.电针透刺组于右侧"犊鼻""内膝眼"予相互透刺5～8 mm,"血海""梁丘"予相互透刺5～8 mm;普通电针组于右侧"犊鼻""内膝眼"予向上与皮肤呈30°角斜刺3～5 mm,"血海""梁丘"予直刺3～5 mm.两组均同样连接电针,疏密波,频率2 Hz/10 Hz,强度0.5～1.5 mA,1次/d,每次20 min,10 d为1个疗程,每疗程间休息2 d,共2个疗程.肌骨超声观察大鼠膝关节积液情况;ELISA法检测大鼠血清IL-1β、IL-6及TNF-α的含量;HE染色法观察大鼠滑膜形态学变化;免疫组织化学法检测大鼠滑膜组织中NF-κB p65的阳性表达;Western blot法检测大鼠滑膜组织中TLR4、MyD88、肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)及NF-κB p65蛋白表达水平.结果:与假手术组比较,模型组膝关节积液明显增多,滑膜内衬层细胞分布不规则,细胞排列紊乱,生成大量血管翳,可见大量炎性细胞浸润,血清IL-1β、IL-6、TNF-α 含量及滑膜组织中NF-κB p65阳性表达增加(P<0.05),TLR4、M yD88、T RA F-6、N F-κB p65蛋白表达水平升高(P<0.05);与模型组比较,电针透刺组和普通电针组膝关节积液明显减少,可见滑膜内衬层细胞增生、少量的炎性细胞浸润和血管翳生成,血清IL-1β、IL-6、T N F-α含量及滑膜组织NF-κB p65阳性表达减少(P<0.05),TLR4、MyD88、TRAF-6、NF-κB p65蛋白表达水平降低(P<0.05);与电针透刺组比较,普通电针组膝关节积液较多,血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量及滑膜组织TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达水平均升高(P<0.05).结论:电针透刺法可显著改善KOA大鼠膝关节滑膜炎性反应状态,减少膝关节积液,其作用机制可能是通过抑制T L R4/M yD88/N F-κB信号通路的转导而抑制其下游炎性级联反应.