UPLC-MS/MS测定患者血浆多黏菌素B的浓度及用药方案优化研究

目的:建立血浆中多黏菌素B浓度测定的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法.方法:采用ACQUITY UPLC HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,流动相组成为0.2％甲酸的水-甲醇和乙腈(1∶1,V/V)溶液,梯度洗脱3.5 min.多反应监测的离子对为多黏菌素B1 m/z 602.4→241.1,多黏菌素B2 m/z 595.5→100.9,多黏菌素E1 m/z 585.5→202.0.按照一房室模型公式,根据多黏菌素B峰浓度和谷浓度进行AUCss,24h的推算.结果:血浆中多黏菌素B1在0.05～5μg·mL-1、B2在0.022～0.553 μg·mL-1内线性关系良好.多黏菌素B1、B2批内和批间的精密度均小于10.9％,准确度为88.8％～105.7％.平均回收率在88.0％～103.2％之间,基质效应为100.0％～113.7％.血浆样本在室温放置6 h、4℃放置24 h、3次冻融循环和-80℃冻存30d均稳定.按照经验用药,纳入观察的6例患者中1例AUCss,24h明显低于50 mg·h·L-1,及时和临床医生反馈,调整后达标.结论:建立了一种快速、准确、灵敏度高、特异性强的UPLC-MS/MS法用于人血浆中多黏菌素B的分析.方法学验证符合生物样本定量分析方法指导原则的要求.本方法适于在临床上开展多黏菌素B的治疗药物监测.