肝硬化合并自发性细菌性腹膜炎患者外周血和腹水CD100水平和免疫调节作用

目的:观察肝硬化合并自发性细菌性腹膜炎（SBP）患者外周血和腹水中CD100水平，并在体外检测CD100对腹水中CD4 +和CD8 +T淋巴细胞活性的影响。 方法:入组肝硬化患者77例（肝硬化合并单纯腹水患者49例、肝硬化合并SBP患者28例），采集外周血和腹水，入组22例对照者采集外周血。酶联免疫吸附试验检测外周血和腹水中可溶型CD100（sCD100），流式细胞术检测CD4 +和CD8 +T淋巴细胞表面膜结合型CD100（mCD100）。分选腹水中CD4 +和CD8 +T淋巴细胞，CD100刺激后检测CD4 +T淋巴细胞增殖、关键转录因子mRNA和分泌细胞因子变化，检测CD8 +T淋巴细胞增殖、重要毒性分子mRNA和分泌细胞因子变化，利用直接接触和间接接触培养系统检测CD8 +T细胞的杀伤活性。符合正态分布的数据使用单因素方差分析、Student t检验或配对 t检验进行比较。不符合正态分布的数据使用Krusal-Willis检验或Mann-Whitney检验进行比较。 结果:血浆sCD100水平在肝硬化合并单纯腹水患者（1 415.0±434.1）pg/ml、肝硬化合并SBP患者（1 465.0±386.8）pg/ml和对照者（1 355.0±428.0）pg/ml之间的差异无统计学意义（ P = 0.655）。肝硬化合并SBP患者腹水sCD100水平低于合并单纯腹水患者[（2 409.0±743.0）pg/ml比（2 825.0±664.2）pg/ml， P = 0.014]。外周血CD4 +和CD8 +T淋巴细胞中mCD100水平在3组间的差异无统计学意义（ P > 0.05）。肝硬化合并SBP患者腹水CD4 +和CD8 +T淋巴细胞中mCD100水平高于合并单纯腹水患者（ P < 0.05）。CD100刺激对肝硬化合并SBP患者腹水中CD4 +和CD8 +T淋巴细胞的增殖无明显影响（ P > 0.05），对效应性CD4 +T淋巴细胞中转录因子（T-bet、维甲酸相关孤独核受体γt、芳香烃受体）表达和细胞因子（干扰素-γ、白细胞介素-17、白细胞介素-22）分泌均无显著影响（ P > 0.05）。CD100刺激可增加肝硬化合并SBP患者腹水CD8 +T淋巴细胞穿孔素、颗粒酶B、颗粒溶素mRNA相对表达量及其分泌干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α的水平（ P < 0.05），亦可增加CD8 +T淋巴细胞的杀伤活性。 结论:CD100的活性形式是sCD100而非mCD100，肝硬化合并SBP患者腹水中存在sCD100和mCD100表达失衡，sCD100可增强肝硬化合并SBP患者腹水CD8 +T淋巴细胞的功能，是潜在治疗靶点之一。