丙氨酸扫描法探究Cn-AMP2肽结构与抗菌活性关系

为研究抗菌肽Cn-AMP2的结构与抗菌活性之间的关系,采用丙氨酸扫描法进行突变,设计一系列抗菌肽Cn-AMP2丙氨酸扫描突变体.应用生物信息学法研究突变体的理化性质参数,测定抗菌肽Cn-AMP2和突变体肽对8种革兰阴性菌和革兰阳性菌的抗菌活性,并以此为基础对抗菌肽Cn-AMP2的构效关系进行深入研究.结果表明,丙氨酸突变后,分子量和净电荷数量无明显变化,但疏水力矩有明显变化.Cn-AMP2和突变体肽抗革兰阴性菌最低抑菌浓度(MIC)为16～354μmol/L,抗革兰阳性菌最低抑菌浓度为26～250μmol/L.圆二色光谱测定表明,Cn-AMP2和突变体肽在222 nm处的摩尔椭圆率分别为-1362,-401 deg·cm2·dmol-1.NPN荧光探针实验表明,Cn-AMP2和突变体肽对细菌细胞外膜破坏强度有明显差异.实验结果表明,第3位丝氨酸、第4位酪氨酸、第8位丝氨酸和第11位甲硫氨酸为关键位点.