犊牛肺炎大肠杆菌的分离鉴定、耐药性及致病力检测

为确定新疆石河子地区某规模化牛场表现为呼吸道症状病死犊牛的细菌性病原,本研究采用常规细菌分离、PCR及生化鉴定方法从采集的病牛组织中分离并鉴定病原菌,采用PCR方法对其系统进化分群、采用K-B纸片扩散法检测细菌的药物敏感性、采用PCR方法分别检测细菌的耐药基因和毒力基因,经腹腔注射菌液进行小鼠的致病性试验,对分离菌株进行生物学特性研究.分离及鉴定结果显示,从病死犊牛的肺脏分离鉴定出的2株大肠杆菌(E1和E2)分属于A群和B1群;药敏试验结果显示两株分离菌对青霉素、阿莫西林、头孢他啶、头孢唑啉、头孢拉定、头孢哌酮、美罗培南、链霉素、妥布霉素、多西环素、麦迪霉素、阿奇霉素、氟苯尼考、替考拉宁、克林霉素耐药;且2株分离菌均检测到β-内酰胺类的blaTEM、喹诺酮类的aac(6')-Ⅰb、gyrA共3种耐药基因以及 crl、csgA、fmH、pap、motA、hlyE、iucD、ompA、espA、LuxS、fyuA、pta 共 12 种毒力基因;分离菌株耐药基因与耐药表型的结果表明分离菌株表现较强的多重耐药现象;小鼠的致病性试验结果显示分离菌株均为致病性大肠杆菌,E1菌株感染小鼠在32 h内全部死亡,E2菌株感染后36 h内死亡3只小鼠.感染小鼠死亡后剖检发现肺脏大面积出血.结果表明新疆石河子地区某规模化牛场表现为呼吸道症状病死犊牛的病原是致病性大肠杆菌,且分离菌表现较强的多重耐药现象并携带大量的毒力基因,但E2菌株的耐药基因与耐药表型相关性不强.本研究为新疆地区大肠杆菌所致犊牛肺炎的防治提供参考依据.