热量限制缓解血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大作用

目的 探讨热量限制(caloric restriction,CR)对血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的大鼠心肌细胞肥大的影响及可能机制.方法 将H9c2细胞分为6组:正常对照组、AngⅡ组(1μmol/L)、热量限制组(CR)、CR+AngⅡ组、NF-κB抑制剂组(CR+AngⅡ+Ss)、NF-κB激动剂组(CR+AngⅡ+Bet).将各组细胞进行相应的药物处理后,用CCK-8法检测细胞活力;鬼笔环肽染色检测心肌细胞表面积;细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、髓过氧化物酶(MPO)及氧化应激指标(ROS、SOD、MDA)的检测采用相应试剂盒;RT-qPCR法检测心肌细胞中肥大相关基因(ANP、BNP、β-MHC)与焦亡相关基因(NLRP3、ASC、GSDMD、caspase1、IL-18与IL-1β)的mRNA表达;Western blot法检测心肌细胞中NLRP3、ASC、GSDMD、caspase1以及NF-κB的蛋白表达水平.结果(1)AngⅡ可诱导H9c2心肌细胞表面积及肥大标志基因(ANP、BNP、β-MHC)的mRNA表达量较对照组显著增加,而这种改变在CR干预下被减弱.(2)CR能逆转AngⅡ诱导的肥大心肌细胞中ROS、MDA、LDH、MPO含量的增加及SOD含量的减少.(3)与AngⅡ组相比,CR处理使AngⅡ诱导的肥大心肌细胞中焦亡相关基因NLRP3、ASC、GSDMD、caspase1及NF-κB的mRNA表达量与蛋白表达量明显降低.(4)NF-κB抑制剂水杨酸钠(Ss)使NLRP3、GSDMD的mRNA表达水平较CR+AngⅡ组进一步降低,而NF-κB激动剂白桦脂酸(BA)则逆转了CR的这种保护作用.结论 CR可以明显缓解AngⅡ诱导的大鼠心肌细胞肥大,CR的心肌细胞保护作用可能与调控NF-κB途径介导的细胞焦亡有关.