归肾丸对卵巢早衰大鼠骨密度及骨微结构的影响及其机制研究

目的 观察归肾丸对卵巢早衰大鼠骨密度及骨微结构的影响,探讨其可能机制,为归肾丸治疗骨质疏松提供实验依据支持.方法 将24只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组和归肾丸组,每组各8只,其中模型组和归肾丸组通过腹腔注射顺铂的方法(第1、8天腹腔注射顺铂溶液6.0 mg/kg)建立卵巢早衰大鼠模型.造模后正常组、模型组灌蒸馏水,归肾丸组给予归肾丸免煎剂[9.45 g/(kg·d)],第30天处死大鼠,留取动脉血、双侧股骨.Micro CT检查各组大鼠骨密度和骨微结构参数;ELISA检测大鼠血清中RANKL/OPG、IL-10及TGF-β的表达水平;免疫组化检测骨组织RANKL、OPG的表达水平;流式细胞术检测外周血CD4+T细胞中CD25+Foxp3+Treg细胞的比例.结果 归肾丸组与模型组比较,Micro CT骨微结构扫描提示BMD、BV/TV、Tb.N、Tb.Th均明显升高(P<0.05);Tb.Sp明显下降(P<0.05);血清中OPG、IL-10的表达较模型组明显升高(P<0.05或P<0.01),RANKL/OPG明显下降(P<0.01),RANKL、TGF-β的表达与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05);流式细胞术检测提示归肾丸组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg比例较模型组明显升高(P<0.05);免疫组化检测提示归肾丸组骨组织OPG表达较模型组升高,RANKL表达下降(P<0.05).直线相关性分析显示外周血Treg细胞的比例与OPG呈显著正相关(r=0.539,P<0.01),与RANKL/OPG比值呈显著负相关(r=-0.578,P<0.01).结论 归肾丸可改善卵巢早衰大鼠骨量减少和保护其骨微结构,其机制可能是通过上调Treg细胞,从而抑制RANKL/OPG途径.