Axin1调节骨骼肌GLUT4蛋白表达的作用研究

目的:探讨体轴发育抑制因子(Axin1)调节骨骼肌葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)蛋白表达的作用及其机制.方法:利用RNAi干扰的Axin1腺病毒(Ad-siAxin1)感染C2C12小鼠骨骼肌细胞敲低Axin1,荧光显微镜和MTS实验明确Ad-siAxin1最佳感染浓度和时间.分别用携带绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-GFP)、Ad-siAxin1、载体质粒(vector)和Axin1质粒转染C2C12小鼠骨骼肌细胞敲低或过表达Axin1蛋白,Western印迹检测Axin1、端锚聚合酶蛋白(TNKS)和GLUT4蛋白水平.结果:荧光显微镜和MTS实验结果显示,在C2C12小鼠骨骼肌细胞中Ad-siAxin1作用的最佳浓度和时间分别为160μL和48 h.Western印迹结果显示,与Ad-GFP组相比,Ad-siAxin1组中Axin1蛋白降低(t=6.746,P＜0.01).Ad-siAxin1组TNKS蛋白水平降低(t=4.019,P＜0.05),GLUT4蛋白水平下调(t=3.248,P＜0.05).与vector组相比,转染Axin1质粒后,Axin1蛋白水平上调(t=4.868,P＜0.01),TNKS和GLUT4蛋白水平上调(t=4.897、4.789,均P＜0.01).结论:Axin1可能通过上调TNKS蛋白表达,调节GLUT4蛋白水平.