衰老SH-SY5Y细胞氧糖剥夺/再灌注模型的建立

目的:探讨衰老SH-SY5Y细胞氧糖剥夺/再灌注模型的建立.方法:将SH-SY5Y细胞随机分为对照(D-半乳糖0 mmol/L)、D-半乳糖(25 mmol/L、50 mmol/L、100 mmol/L、200 mmol/L、400 mmol/L)组,分别给予对应浓度的D-半乳糖处理48 h,显微镜观察细胞形态的改变、β-半乳糖苷酶试剂盒检测β?半乳糖苷酶活性、EdU试剂盒检测细胞增殖率以及CCK?8法检测细胞存活率,确定D?半乳糖致衰浓度,建立衰老模型.将衰老SH?SY5Y细胞随机分为对照(氧糖剥夺不处理)、氧糖剥夺处理(0.5 h、1 h、1.5 h、2 h)组,随后复糖复氧24 h,CCK?8检测衰老SH?SY5Y细胞存活率.结果:25 mmol/L、50 mmol/L组的细胞形态、β?gal活性与对照组比较没有明显变化(P>0.05),100 mmol/L组细胞可见胞体肥大,200 mmol/L组细胞染色质固缩,400 mmol/L组细胞出现大量空泡化;(100 mmol/L～400 mmol/L)组细胞β?半乳糖苷酶染色阳性率与对照组比明显升高(P<0.05),100 mmol/L、200 mmol/L组间差异不大(P>0.05);(100 mmol/L～400 mmol/L)组细胞增殖能力明显下降,呈浓度依赖性降低(P<0.05);细胞存活率呈浓度依赖性降低(P<0.05),IC50在100 mmol/L和200 mmol/L之间.衰老SH?SY5Y细胞存活率呈氧糖剥夺时间依赖性降低(P<0.05),IC50接近1 h.结论:D?半乳糖浓度为100 mmoL/L且作用细胞48 h,可建立存活率约50％的衰老SH?SY5Y细胞模型,氧糖剥夺衰老SH?SY5Y细胞1 h再灌注24 h可建立存活率接近50％的衰老SH?SY5Y细胞氧糖剥夺/再灌注模型.