人肠道α-防御素5促进辐照诱导小鼠肠道损伤的修复

目的 观察辐照对C57小鼠肠道的损伤作用及人α-防御素5(human α-defensin 5,HD5)在其中的保护效应及功能.方法 基于C57小鼠构建肠道α-防御素敲除小鼠(MMP7-/-小鼠)模型,随后将HD5基因转入MMP7-/-小鼠,构建HD5转基因小鼠(HD5tg小鼠)模型.将实验分为野生型C57小鼠组(WT组)、MMP7-/-小鼠组和HD5tg小鼠组.利用5 Gy X射线(1.26 Gy/min)辐照各组小鼠后,统计分析30 d内小鼠生存状况,同时在0、2、10 d收取小鼠回肠组织.利用HE染色观察小鼠回肠病理损伤;TUNEL评估小鼠肠黏膜组织细胞凋亡;免疫荧光和PAS染色分析回肠肠道干细胞增殖、分化状态;Western blot检测TLR4、MyD88、NF-κB等蛋白表达;RT-qPCR检测肠黏膜IL-1、IL-6及IL-10等炎症因子转录水平.结果 成功构建并繁育MMP7-/-和HD5tg小鼠,WT组、MMP7-/-组、HD5tg组辐照后30 d小鼠生存率分别为50％(10/20)、35％(7/20)和55％(11/20),WT组和HD5tg组小鼠生存率显著高于MMP7-/-组(P＜0.05),WT组和HD5tg组小鼠组间生存率无统计学差异.与MMP7-/-组相比,HD5转入后显著改善小鼠辐照后小肠绒毛和隐窝结构病理损伤;抑制肠黏膜细胞发生凋亡;促进肠道干细胞增殖、分化;抑制TLR4-MyD88-NF-KB信号通路活性,进而降低IL-1β、IL-6炎性因子表达水平(P＜0.05).结论 HD5通过改善辐照诱导的小鼠肠道上皮屏障功能障碍,促进肠黏膜细胞更新和组织修复,抑制炎性损伤,进而增强C57小鼠抗辐照能力.