NR1D1在血管外膜成纤维细胞增殖和迁移中的作用

目的 探讨核受体亚家族1组D成员1(nuclear recep-tor subfamily 1,group D,member 1,NR1 D1)在小鼠血管外膜成纤维细胞(adventitial fibroblasts,AFs)增殖和迁移中的作用及机制.方法 培养C57BL/6J小鼠原代AFs,用携带Nr1d1基因的腺病毒转染AFs过表达NR1D1,用SKL2001恢复β-连环蛋白(β-catenin)表达.增殖细胞核抗原(Ki-67)细胞免疫荧光染色和CCK-8试剂盒用于检测细胞增殖,划痕实验用于检测细胞迁移速度.qPCR检测Nr1d1的mRNA水平,Western blot检测NR1 D1、β-catenin蛋白水平.为了探究NR1 D1在血管内膜增生中的作用,将20只雄性野生型C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、颈动脉内皮损伤组、假手术+SR9009(NR1 D1激动剂)组以及颈动脉内皮损伤+SR9009组,每组5只.造模完成后按组分别腹腔注射DMSO或SR9009(100 mg·kg-1·d-1),持续14 d.造模成功28 d后取材,HE染色观察颈动脉内膜增生程度.结果 过表达NR1D1明显降低Ki-67阳性细胞率(P<0.01)及总细胞数目(P<0.01),并且使AFs划痕愈合速度减慢(P<0.01).过表达NR1 D1明显抑制 β-catenin表达(P<0.05).SKL2001恢复β-catenin表达后,过表达NR1D1对AFs增殖和迁移的抑制作用消失(P<0.01).上调NR1D1活性能减轻颈动脉内皮损伤后内膜增生(P<0.01).结论 NR1D1可能通过抑制β-catenin表达,从而抑制小鼠AFs的增殖和迁移.