3种冰片对脑缺血/再灌注急性期模型大鼠不同脑区的保护作用

首次平行比较艾片、天然冰片、合成冰片不同剂量对脑缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)急性期模型大鼠不同脑区损伤的改善作用强弱,为指导临床治疗缺血性脑卒中早期合理应用提供参考,具有重要学术和应用价值.将健康SPF级SD雄性大鼠按体质量随机分为假手术组,模型组,聚山梨酯(吐温)模型组,阳性药组(尼莫地平),艾片、天然冰片、合成冰片分别设0.2、0.1、0.05 g·kg-13个剂量组,共13组.预给药3 d,线栓法制备I/R模型,激光散斑成像技术判定大鼠造模成功,再给药1 d.干预给药前以及预给药第1、2、3天,造模苏醒后2 h、造模后1 d定时监测体温;造模苏醒后2 h及次日Zea-Longa法及mNSS评分法予神经功能评分;末次给药后30 min麻醉大鼠,腹主动脉取血,酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorb-nent assay,ELISA)检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-beta,TGF-β1)水平;取脑组织予氯化三苯基四氮唑(tri-phenyltetrazolium chloride,TTC)染色计算脑梗死率,苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察各脑区并半定量评价病理损伤程度,免疫组织化学法检测小胶质细胞离子钙结合适配器分子1(ionized calcium binding adapter molecule 1,IBA1)蛋白表达,q-PCR技术检测小胶质细胞极化表型M1、M2标志物诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、精氨酸酶1(arginase 1,Arg1)mRNA表达水平.与假手术组相比,模型组与吐温模型组大鼠体温、Zea-Longa评分、mNSS评分、脑梗死率均显著升高;皮层、海马、纹状体神经损伤严重,血清IL-6显著升高,TNF-α有升高趋势,IL-4、TGF-β1有降低趋势.3种冰片不同剂量组有降低造模第1天大鼠体温趋势;合成冰片0.2、0.05 g·kg-1,艾片0.1 g·kg-1组可降低大鼠Zea-Longa及mNSS评分;3种冰片0.2 g·kg-1组均能明显降低脑梗死率;艾片0.2、0.1 g·kg-1,天然冰片0.1 g·kg-1组可明显降低皮层病理损伤;艾片与天然冰片0.1 g·kg-1组可减轻海马病理损伤,艾片0.2 g·kg-1组可减轻纹状体损伤;艾片0.2 g·kg-1、天然冰片与合成冰片3个剂量组可显著降低大鼠血清TNF-α 水平,合成冰片0.1 g·kg-1组还可降低大鼠IL-6水平;艾片、合成冰片0.2 g·kg-1组可明显抑制皮层小胶质细胞活化,艾片0.2 g·kg-1组可增强Arg1表达,降低iNOS表达水平.3种冰片可通过抗炎减轻I/R大鼠急性期各脑区的病理损伤而发挥脑保护作用,其机制可能与抑制小胶质细胞活化及促使其由M1型向M2型极化实现有关.综合提示脑保护效应强弱呈艾片>合成冰片>天然冰片趋势.急性期推荐优选艾片.