消岩汤干预Beclin1-YAP1环路逆转肺癌顺铂耐药研究

目的 探讨消岩汤逆转肺癌顺铂耐药的具体分子机制.方法 高表达Beclin1肺腺癌耐药(lung adenocarcinoma drug-resistant,A549/DDP)、低表达 Beclin1 A549/DDP、高表达 Yes 关联蛋白 1(Yes-associated protein 1,YAP1)A549/DDP和低表达YAP1 A549/DDP细胞分别给予消岩汤和顺铂干预,采用Transwell和克隆形成实验检测细胞侵袭和增殖;采用Western blotting 检测 Beclin1、YAP1、P 糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、肺耐药相关蛋白(lung resistance-related protein,LRP)、转录调节因子(transcriptional coactivator with PDZ-binding motif,TAZ)、磷酸化信号转导与转录激活因子3(phosphorylated signal transducers and activators of transcription 3,p-STAT3)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)表达.BALB/c 小鼠 sc 高表达 Beclin1 A549/DDP、低表达 Beclin1 A549/DDP、高表达 YAP1 A549/DDP和低表达YAP1A549/DDP细胞建立移植瘤模型,ig消岩汤和瘤内注射顺铂治疗14d,采用免疫组化检测肿瘤Beclin1、YAP 1、P-gp和LRP蛋白表达.结果 消岩汤联合顺铂作用于高表达Beclin1和高表达YAP1肺癌细胞株,细胞侵袭和增殖能力增强(P＜0.05),而低表达Beclin1和低表达YAP1肺癌细胞株,肺癌耐药细胞株侵袭和增殖能力减弱(P＜0.05);低表达Beclin1肺癌细胞株Beclin1、YAP1、P-gp和LRP蛋白表达水平均明显降低(P＜0.05);高表达Beclin1肺癌细胞株Beclin1、YAP1、P-gp和LRP蛋白表达水平均明显升高(P＜0.05);低表达YAP1肺癌细胞株p-STAT3、TAZ、Beclin1、YAP1、P-gp和LRP蛋白表达水平均明显降低(P＜0.05);高表达YAP1肺癌细胞株TAZ、Beclin1、YAP1和P-gp蛋白表达水平均明显升高(P＜0.05).小鼠移植瘤模型中,高表达Beclin1组和高表达YAP1组瘤体大于对照组,而低表达Beclin1组和低表达YAP1组瘤体小于对照组.结论.消岩汤通过Beclin1直接影响YAP1表达,消岩汤又可通过YAP1-TAZ通路影响Beclin1表达,消岩汤可能通过干预Beclin1-YAP1环路逆转肺癌顺铂耐药.