苗药五藤膏外敷对膝骨关节炎兔模型的治疗作用及机制

目的 探讨苗药五藤膏外敷对膝骨关节炎(KOA)兔模型的治疗作用及机制.方法 采用随机数字表法将96只家兔分为空白对照组、模型组、巴布膏组及五藤膏低、中、高剂量组,每组16只.除空白对照组外,其余组用4％木瓜蛋白酶生理盐水溶液制备KOA模型.造模第6周,空白对照组、模型组每日给予无菌纱布包扎固定右膝关节;巴布膏组给予氟比洛芬巴布膏贴敷于兔右膝关节前方;苗药五藤膏低、中、高剂量组分别给予1、2、4 g五藤膏贴敷于兔右膝关节前方.均用绷带包扎固定4 h,每日给药1次,干预4周.分别于给药1、2、3、4周每组各取4只家兔处死,取右侧股骨内髁顶点钙化层以上软骨.HE染色后观察软骨组织形态变化,用Mankin's评分评价膝关节软骨组织病理学改变程度;用qRT-PCR法检测膝关节软骨组织中Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因(GSK-3β、MMP-3、OPG)及Notch信号通路下游靶基因(Notch1)表达.结果 空白对照组关节软骨表面光滑平整,结构清晰;模型组关节软骨表面粗糙不平整,结构模糊,软骨细胞数目少且分布紊乱;五藤膏高剂量组关节软骨表面较光滑平整,结构较清晰,软骨细胞数目较多且分布较均匀;苗药五藤膏低、中剂量组及巴布膏组伴不同程度的关节肿胀及滑膜充血,层次结构较模糊,软骨细胞数量较少且分布轻度紊乱.与空白对照组比较,模型组膝关节软骨组织Mankin's评分高(P<0.05);与模型组比较,各治疗组Mankin's评分低(P均<0.05),且五藤膏高剂量组Mankin's评分最低(P均<0.05).与空白对照组比较,模型组膝关节软骨组织中GSK-3β、MMP-3、Notch1 mRNA表达高(P均<0.05),OPG mRNA表达低(P<0.05);与模型组比较,各治疗组GSK-3β、MMP-3、Notch1 mRNA表达低(P均<0.05),OPG mRNA表达高(P均<0.05),且五藤膏高剂量组以上指标变化最明显(P均<0.05).结论 苗药五藤膏可改善KOA兔膝关节软骨及软骨下病变,延缓病程进展,其机制可能与调控Wnt/β-catenin、Notch信号通路下游靶基因有关.