灰毡毛忍冬乙醇提取物减缓D-半乳糖致小鼠胚胎成纤维细胞氧化应激的效果

为探讨灰毡毛忍冬乙醇提取物对D-半乳糖诱导小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)氧化应激的保护作用及其潜在机制,通过广泛靶标代谢组测序和高效液相色谱法检测灰毡毛忍冬乙醇提取物中活性物质,采用20 mg/mL的D-半乳糖处理MEF细胞,建立细胞衰老模型,试验设置对照组(0 mg/mL的D-半乳糖)、模型组(20 mg/mL的D-半乳糖)、灰毡毛忍冬乙醇提取物组(100、500、1000μg/mL的灰毡毛忍冬乙醇提取物添加20 mg/mL的D-半乳糖)、阳性对照组(50μg/mL的三七总皂苷添加20 mg/mL的D-半乳糖),按照试验分组,将细胞在37℃、5％的CO2培养箱中培养48 h,检测细胞抑制率、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量、线粒体膜电位(MMP)和线粒体活性氧(mtROS)水平,以及p53、p16、线粒体复合体基因、Bcl-2、Caspase-3的表达水平.结果表明:灰毡毛忍冬乙醇提取物中含有酚酸、黄酮、有机酸、萜类等大量活性物质;与对照组相比,模型组细胞抑制率显著增加,细胞数量显著减少,MMP下降,mtROS水平增加,SOD含量降低,MDA含量增加,线粒体复合体蛋白NDUFV1和抑凋亡蛋白Bcl-2明显下降,Caspase-3明显上升;与模型组相比较,灰毡毛忍冬乙醇提取物组和阳性对照组有效降低了细胞抑制率,显著提高了细胞数量和SOD活性,降低了MDA含量,提高MMP水平,降低mtROS含量,有效降低p53、p16、Caspase-3的蛋白水平,升高Bcl-2、NDUFV1的蛋白水平.说明在MEF细胞中,灰毡毛忍冬乙醇提取物可通过增加线粒体复合体I蛋白富集和减缓细胞凋亡来减弱D-半乳糖所诱导的氧化应激效应.