仲景炮附子对慢性心力衰竭的治疗作用及机制研究

目的 研究仲景炮附子AconitiLateralisRadixPreparata对慢性心力衰竭(CHF)的治疗作用,并采用超高效液相色谱四级杆静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-QE-Orbitrap-MS)测定仲景炮附子水煎液的成分,结合网络药理学探究其治疗CHF的作用机制.方法 采用ip盐酸阿霉素构建大鼠CHF模型,ig给予仲景炮附子水煎液(3.3g·kg-1)16 d后,试剂盒法检测血清脑钠素(BNP)含量、心肌组织Ca2+-ATP酶和Na+,K+-ATP酶活性,苏木素-伊红(HE)染色后镜下观察左心室组织病理学形态变化.采用UPLC-QE-Orbitrap-MS测定仲景炮附子水煎液的成分,借助Swiss Target Prediction、DrugBank、Gene Cards、OMIM、TTD等平台预测仲景炮附子治疗CHF的作用靶点,利用Cytoscape软件构建相关作用网络,并对核心基因进行基因本体论(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析.结果 与对照组比较,模型组大鼠出现稀便、腹水、体质量减轻等现象;血清BNP水平显著升高(P＜0.01);Ca2+-ATP酶、Na+,K+-ATP酶活力均有降低趋势;左心室心肌组织切片出现明显的心肌纤维断裂,心肌间隙增宽,出现部分空泡变性等病理变化.与模型组比较,仲景炮附子水煎液组大鼠稀便情况得到一定程度改善,腹水和体型消瘦情况改善不明显;BNP水平显著降低(P＜0.05);Ca2+-ATP酶、Na+,K+-ATP酶活力均有升高趋势;左心室组织病理学形态有明显改善.采用UPLC-QE-Orbitrap-MS共鉴定出仲景炮附子水煎液主要成分52个.通过网络药理学预测得到仲景炮附子治疗CHF活性成分43个,活性成分靶点472个,CHF疾病靶点1 063个,活性成分与疾病交集靶点68个;网络分析结果表明,仲景炮附子可能通过作用于信号转导与转录激活子3(STAT3)、磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸3-激酶催化亚基a(PIK3CA)、MAPK1等关键靶点发挥抗CHF作用,涉及到RAS相关蛋白1(Rap1)、磷脂酰肌醇3'-激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)等信号通路.结论 仲景炮附子对阿霉素诱导的慢CHF有一定的治疗作用,可通过多成分、多靶点、多途径发挥作用.