两株大蒜病毒外壳蛋白基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

利用建立cDNA库的方法,通过RT-PCR分别扩增和克隆了感染我国天津地区大蒜的大蒜花叶病毒(GMVc)和大蒜潜隐病毒(GLVc)的外壳蛋白(CP)基因,并对其分别在原核细胞中进行了诱导表达和表达产物的分析.克隆基因的序列测定与分析表明,GMVc的CP基因全长867个核苷酸,编码289个氨基酸,与报道的一株GMV的核苷酸和氨基酸的同源性分别为88.5%和97.2%,属于马铃薯Y病毒属(Potyvirus)的成员;GLVc的CP基因全长885个核苷酸,编码294个氨基酸,与报道的一株GLV的核苷酸和氨基酸同源率分别为73.6%和90.9%,属于香石竹潜隐病毒属(Carlavirus)的成员;克隆基因的表达产物经SDS-PAGE分析表明,GMVc和GLVc的外壳蛋白分别约32kD和34kD,与预测的结果一致.本实验结果对感染我国大蒜的病毒进行分子水平的确切诊断、分类和调查奠定了基础,将对大蒜病毒病的防治与脱毒大蒜的生产具有重要的意义.