小核仁RNA宿主基因5对骨髓间充质干细胞成骨分化和凋亡的影响

Hai-tao Jiang,Ji-wei Zheng, Fang Li, Kai Zhang, Ying Qin, Jiang-lan Xia,Jin-hu Sun

wf(2022)

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摘要
目的 探究小核仁RNA宿主基因5(SNHG5)在调控骨髓间充质干细胞成骨分化和凋亡中的作用.方法 成骨诱导液诱导骨髓间充质干细胞成骨分化,不同质粒转染分组,Western blotting法检测成骨标志物(OCN、OSX、COL1A1)的蛋白相对表达量,茜素红染色和碱性磷酸酶(ALP)检测成骨效果,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测SNHG5和OCN mRNA相对表达量.将细胞随机分为两组,实验组下调SNHG5表达,对照组不下调,同法进行成骨诱导,检测OCN、OSX及COL1A1的蛋白相对表达量,检测成骨效果,检测OCN、OSX、COL1A1及SNHG5 mRNA相对表达量.采用流式细胞术检测细胞凋亡,并检测Caspase-3活性.结果 成骨诱导后第14天的OCN、OSX及COL1A1蛋白相对表达量高于诱导后第7天和诱导前(P<0.05),诱导后第7天高于诱导前(P<0.05).成骨诱导前、诱导后第7天、诱导后第14天的ALP活性和茜素红浓度比较,差异有统计学意义(P<0.05).成骨诱导前、诱导后第1天、第3天、第5天、第7天、第14天的SNHG5和OCN mRNA相对表达量随时间推移逐渐升高(P<0.05).转染不同质粒后,各组SNHG5 mRNA相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05),细胞转染质粒后第14天实验组OCN、OSX及COL1A1 mRNA和蛋白相对表达量低于对照组(P<0.05),细胞转染质粒后第14天实验组ALP活性和茜素红浓度低于对照组(P<0.05),实验组细胞凋亡率和Caspase-3活性高于对照组(P<0.05).结论 SNHG5参与骨髓间充质干细胞成骨分化和凋亡,可能在骨质疏松症的发展中起促进作用,为改善颌骨骨质疏松的治疗提供新靶点.
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