免疫蛋白酶体亚基低分子重量蛋白2基因敲除大鼠的繁殖与基因型鉴定

目的 进行完全性敲除免疫蛋白酶体亚基低分子重量蛋白2(LMP2)基因(LMP2-/-)Sprague-Dawley(SD)大鼠繁殖及鉴定.方法 LMP2基因杂合子(LMP2+/-)SD大鼠饲养及配种繁殖,提取子代大鼠鼠尾基因组DNA,采用聚合酶链反应(PCR)方法进行基因型鉴定,将获得的纯合子大鼠与异性杂合子交配,以获得更多的基因敲除纯合子大鼠.结果 LMP2杂合子SD大鼠繁殖生成子代有37只,日常饮食、活动和生长发育在各动物间未见无明显差异.37只子代大鼠基因型分别为野生型(WT)(LMP2+/+)9只、杂合子型(LMP2+/-)17只和纯合子型(LMP2-/-)11只.各基因型的PCR产物经琼脂糖凝胶电泳条带情况分别为野生型未出现条带,纯合子大鼠仅出现500bp条带,杂合子大鼠出现500 bp、738 bp两个条带.结论 LMP2基因敲除大鼠成功繁殖,为后续实验奠定了基础.