SIRT1对TGF-β1活化肾脏成纤维细胞的抑制机制

[目的]探讨沉默信息调节因子1(SIRT1)对转化生长因子β1(TGF-β1)活化肾脏成纤维细胞的抑制作用及机制.[方法]设立成纤维细胞NRK-49F组、TGF-β1刺激组(10 ngl/mL)、SIRT1蛋白低、中、高剂量组(10.0 μg/mL、100.0 μg/mL、1 000.0 μg/mL),以上各组每孔设6个平行样,培养72 h.采用MTT法测定各组细胞活力,流式细胞术测定细胞凋亡水平,ELISA法测定细胞纤维化程度α-SMA、FN、Vimentin蛋白水平,RT-PCR法及蛋白印迹法测定Smad3、SOSC1 mRNA 和蛋白水平.[结果]TGF-β1 刺激组 OD 值、存活率、α-SMA、FN、Vimentin 蛋白、Smad3、SOSC1 mRNA和蛋白表达水平高于成纤维细胞NRK-49F组,凋亡率低于成纤维细胞NRK-49F组(P＜0.05).SIRT1蛋白低、中、高剂量组OD值、存活率、α-SMA、FN、Vimentin蛋白、Smad3、SOSC1 mRNA、Smad3、SOSC1蛋白表达水平低于TGF-β1刺激组,凋亡率高于TGF-β1刺激组,随着SIRT1蛋白剂量逐渐增加,SIRT1蛋白各剂量组OD值、存活率、α-SMA、FN、Vimentin蛋白、Smad3、SOSC1 mRNA和蛋白表达明显降低,凋亡率明显升高(P＜0.05).[结论]SIRT1蛋白通过抑制TGF-β1活化肾脏成纤维细胞中Smad3、SOSC1 mRNA与蛋白的表达,降低TGF-β1活化肾脏成纤维细胞的增殖及纤维化,促进细胞凋亡.