血培养阳性标本分离胶促凝管联合SDS前处理与固体培养基短时培养菌膜应用MALDI-TOF MS快速鉴定最佳时间探讨

目的 探讨血培养阳性标本分离胶促凝管联合十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)前处理与固体培养基短时培养菌膜应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)快速鉴定的最佳时间.方法 收集2020年8月～2021年1月来源于咸阳市第一人民医院微生物室的243瓶血培养阳性(单数菌)样本,采用MALDI-TOF MS技术对分离胶促凝管联合SDS前处理标本直接鉴定,同时对固体培养基短时培养(6h内)菌膜鉴定,以传统培养(24h)方法鉴定结果为金标准,分析MALDI-TOF MS快速鉴定血培养阳性菌株的最佳方法和时间.结果 243瓶血培养阳性标本共鉴定出病原菌44种,分离率前五位的细菌为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌.SDS前处理法直接鉴定总符合率为75.72％(184/243),其中革兰阴性菌和革兰阳性菌符合率分别为84.97％(130/153)和60.00％(54/90);固体培养基生长2h,4h和6h的菌膜鉴定总符合率依次为44.44％(108/243),72.02％(175/243)和90.53％(220/243),其中革兰阴性菌依次为59.48％(91/153),83.01％(127/153)和92.81％(142/153),革兰阳性菌依次为18.89％(17/90),53.33％(48/90)和86.67％(78/90).金黄色葡萄球菌SDS前处理法直接鉴定和2h,4h生长菌膜鉴定符合率均高于凝固酶阴性葡萄球菌(χ2=4.795,12.083,9.035,均P<0.01).革兰阴性菌SDS前处理法直接鉴定和2h,4h生长菌膜鉴定符合率均高于革兰阳性菌(χ2=17.880,37.808,24.758,均P<0.01).结论 MALDI-TOF MS可对血流感染(bloodstream infection,BSI)主要病原菌进行快速直接鉴定,根据革兰染色结果联合固体培养基短时培养菌膜鉴定,可进一步缩短细菌鉴定时间,为临床抗感染治疗提供早期依据.