基于网络药理学探讨身痛逐瘀汤治疗腰椎间盘突出症的作用机制

目的:运用网络药理学方法探讨身痛逐瘀汤治疗腰椎间盘突出症(LDH)的作用机制.方法:利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、化学专业数据库获取身痛逐瘀汤中各味中药的相关化学成分,于SwissTargetPrediction平台实现活性成分靶点预测;分别于人类基因数据库(GeneCards)、在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)、DisGeNET数据库检索LDH疾病靶点;将中药成分靶点与LDH靶点取交集,即身痛逐瘀汤治疗LDH的潜在作用靶点;应用Cytoscape软件构建身痛逐瘀汤治疗LDH的中药-化学成分-交集靶点网络图;利用String数据库完成蛋白质-蛋白质相互作用分析及关键靶点的筛选,运用Cytoscape构建网络图;通过DAVID平台对关键靶点进行基因本体(GO)富集分析和京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析,初步揭示其作用机制.以髓核细胞作为实验研究对象,分为单纯压力组与中药组(加入身痛逐瘀汤中药血清干预),置于静水压加载装置,1 MPa加压干预下作用2、4、6 h,应用凋亡试剂盒检测髓核细胞的凋亡情况,通过蛋白质印迹法检测髓核细胞核因子κB p65、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、胱天蛋白酶3蛋白的表达情况.结果:筛选得到身痛逐瘀汤121个活性成分和871个作用靶点,LDH疾病相关靶点438个,身痛逐瘀汤治疗LDH的潜在作用靶点75个,关键作用靶点69个;GO及KEGG富集分析显示关键靶点主要通过参与癌症通路、促分裂原活化的蛋白激酶信号通路、磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B信号通路、肿瘤坏死因子信号通路、核因子κB信号通路等信号通路对LDH进行调控.身痛逐瘀汤可降低髓核细胞凋亡,降低核因子κB p65、MMP-13、胱天蛋白酶3的蛋白表达水平(P<0.05).结论:身痛逐瘀汤通过多成分、多靶点、多通路治疗LDH,其作用机制可能与核因子κB信号通路的抑制以及细胞外基质的分解代谢相关.