长链非编码RNA HGBC在乳腺癌中的表达及其对肿瘤细胞恶性生物学行为的影响

目的 检测长链非编码RNAHGBC(Lnc HGBC)在乳腺癌中的表达并观察LncHGBC对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭影响.方法 利用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测LncHGBC 在人乳腺癌细胞系(MDA-MB-231:5.323±2.330,MCF7:2.963±1.304,T47D:4.017±1.750,BT549:2.670±1.170)及正常乳腺细胞MCF10A(1.247±0.576)中的表达差异.应用小干扰技术(si-RNA)敲低LncHGBC的表达量,并利用EDU实验(阴性对照组比敲低组为48.330±6.236比20.330±3.682,t=5.468,P＜0.05),平板克隆实验(阴性对照组 比敲低组为68.330±8.498比39.670±4.110,t=4.295,P＜0.01)、细胞计数试剂盒(CCK-8)实验(阴性对照组 比敲低组为0.900±0.081比0.576±0.057,t=3.894,P＜0.01)、Transwell实验(阴性对照组 比 敲低组为71.667±8.498 比 45.000±4.082,t=4.000,P＜0.05)检测 LncHGBC 敲低后对 MDA-MB-231 增殖、迁移及侵袭能力的影响.借助双荧光素酶实验探索LncHGBC调控miR-618分子机制.两组之间的比较采用独立样本t检验,临床数据分析采用x2检验或费舍尔精确数据检验.结果 RT-PCR检测出乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MCF7、T47D、BT549)中LncHGBC的相对表达水平分别为5.323±2.330、2.963±1.304、4.017±1.750,2.670±1.170,显著高于正常乳腺细胞 MCF10A(1.247±0.576),差异有统计学意义(P＜0.05).EDU实验结果显示,敲低LncHGBC后,EDU阳性细胞比例明显低于阴性对照组(20.330±3.682比48.330±6.236,t=5.468,P＜0.05).平板克隆实验显示,敲低LncHGBC后,细胞集落的数量明显低于阴性对照组(39.670±4.110比68.330±8.498,t=4.295,P＜0.01).CCK-8实验显示,敲低LncHGBC组细胞增殖能力明显低于阴性对照组(0.576±0.057比0.900±0.081,t=3.894,P＜0.01)o Transwell实验显示敲低LncHGBC组细胞穿膜数量明显低于阴性对照组(45.000±4.082比71.667±8.498,t=4.000,P＜0.05).侵袭实验显示敲低LncHGBC 组细胞穿膜数目低于对照组(21.333±4.189 比 43.666±4.497,t=5.139,P＜0.05).RT-PCR 结果显示敲低 LncHGBC,能够上调 miR-618 表达(2.500±0.408 比 1.000±0.122,t=4.977,P＜0.01).双荧光素酶实验显示,LncHGBC可以结合miR-618抑制miR-618的表达(2.500±0.408比1.000±0.122,t=4.977,P＜0.01).结论 LncHGBC在乳腺癌中表达量增高,并通过降低miR-618来促进乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力.