贴壁细胞超声脱壁技术研究

细胞从培养皿表层脱壁是贴壁细胞传代的必须操作,目前,胰蛋白酶消化法是细胞脱壁的主要方法,但该方法操作复杂,难以实现自动化细胞培养.此外,胰蛋白酶还会对细胞蛋白造成不可逆的伤害,造成细胞产量下降及自修复时间长等问题.超声脱壁技术使用物理手段完成细胞脱壁,可以避免损伤细胞蛋白,实现脱壁过程的自动化.该文研究了一种超声脱壁技术,采用基于亮场显微镜的细胞融合度检测方法,对超声脱壁技术的脱壁效果进行评估,以人脐带间充质干细胞为目标细胞,研究了贴壁细胞超声脱壁技术的关键控制参数.实验结果显示,当超声换能器输入电压为255 V、超声频率为159～161 kHz扫频、超声时间为2 min时,将细胞与超声换能器距离调至3 mm,使用12 mL生理盐水作为震荡液体,可以使T75瓶中细胞脱壁面积达到95％,细胞成活率达到70％.