伤寒沙门氏菌质粒DNA参考物质的研制

目的 制备包含伤寒沙门氏菌的三种检测靶标序列se、st、aceA的质粒DNA参考品.方法 设计一种质粒DNA包含目前用于沙门氏菌检测和分型常用的se、st、aceA的质粒(pDNA Salmo?nella),对其序列的稳定性,均一性和量值可追溯性进行评价,并验证其与沙门氏菌基因组DNA参考品在实时定量PCR应用中的可比性.结果 经多个实验室定值后,pDNA Salmonella最终定值结果为30.08μg/mL pDNA.Salmonella均一性,稳定性良好,可在-20℃长期保存,并且在实时定量PCR应用中与基因组参考品具有可比性.结论 pDNA Salmonella具有良好的序列准确性和可追溯性,这项研究重点是证明了快速合成的质粒作为鉴定伤寒沙门氏菌qPCR参考品的可行性.