亮氨酸羧基甲基转移酶1对锰致神经细胞凋亡的拮抗作用

目的 探索亮氨酸羧基甲基转移酶1(LCMT1)高表达对锰诱导神经细胞损伤的拮抗作用.方法 利用脂质体将LCMT1-PCDNA 3.0和PCDNA 3.0质粒分别转染小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a细胞),通过G418筛选稳定高表达LCMT1的LCMT1-N2a细胞和PCDNA-N2a细胞,Western blot检测显示LCMT1蛋白过表达情况.将LCMT1-N2a细胞和PCDNA-N2a细胞分别暴露于空白培养基(对照组)和不同浓度氯化锰(250、500、1000、2000μmol/L)12 h后以刃天青法检测细胞活性.随后,用流式细胞仪检测染锰(0、500、1000μmol/L)12 h后细胞的凋亡率.结果 LCMT1蛋白在LCMT1-PCDNA 3.0细胞中的表达高于对照组且差异具有统计学意义(P<0.05);转染后细胞的形态与转染前无明显变化.锰暴露可使PCDNA-N2a细胞活性下降且有剂量-反应关系,相同浓度锰暴露下LCMT1-N2a细胞存活率高于PCDNA3.0 N2a(P<0.05).PCDNA3.0 N2a细胞的凋亡率随着染锰浓度增加而升高且存在剂量-反应关系;在相同的染锰剂量下,LCMT1-PCDNA3.0 N2a细胞的凋亡率低于PCDNA3.0 N2a细胞(P<0.05).结论 LCMT1高表达可以拮抗锰致N2a细胞细胞活性的下降和细胞凋亡.